Descongelar congelado Suero fetal bovino (SFB) durante la noche a 2℃ a 8℃ y luego transferirlo a un baño de agua a 37℃ o a temperatura ambiente y remueva suavemente cada 10-15 minutos hasta que se derrita por completo. Evite el calentamiento rápido (>37 ℃) en el microondas o los ciclos repetidos de congelación y descongelación, ya que desnaturalizan factores de crecimiento vitales y provocan una fuerte precipitación de proteínas. Es fundamental agitarlo uniformemente a intervalos regulares durante el proceso de descongelación.
- Por qué es importante el control de la temperatura
-Evita la crioprecipitación: A medida que el hielo se derrite, las sales y proteínas densas se depositan en el fondo. Sin una agitación periódica, las altas concentraciones locales de sal provocan que las proteínas se agreguen formando copos insolubles.
-Protege los componentes sensibles al calor: Temperaturas superiores 37℃ desnaturalizan proteínas de señalización esenciales (por ejemplo, IGF-1, FGF), reduciendo la proliferación celular.
- Protocolo estándar de descongelación en 4 pasos
1. Refrigeración en frío (reducción de temperatura):12–24 horas.
Trasladar FBS congelado desde -20℃ a un 2℃ a 8℃ Refrigerar durante la noche para evitar el choque térmico.
2. Baño de agua a 37 °C:30–60 minutos.
Coloque la botella en un 37℃ Baño de agua (mantenga la tapa fuera del agua para evitar la contaminación). o a temperatura ambiente .
3. Remolino intermitente:Cada 10-15 minutos.
Invierta suavemente la botella periódicamente para dispersar el gradiente de sal/proteína y evitar la precipitación.
4. Alicitación inmediata:Campana aséptica.
Retírela inmediatamente una vez descongelada, límpiela con etanol al 70 % y divídala en alícuotas en tubos de un solo uso para evitar ciclos repetidos de congelación y descongelación.
P: ¿Qué ocurre si veo escamas o precipitados después de descongelar?
A: Una ligera precipitación es normal (fibrina/lipoproteínas insolubles) y no afecta el crecimiento celular. Aclarar mediante centrifugación breve (400×g, 5 min) o filtración con PES de 0,2 μm.
P: ¿Cuánto tiempo dura el FBS líquido a las 2 ℃ a 8 ℃ ?
A: El suero fetal bovino líquido completamente descongelado permanece estable a 2 ℃. a 8 ℃ menos de un mesMantener las posiciones a largo plazo congeladas en -5℃a -20℃ .
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